[发明专利]一种多肽——多聚核苷聚合酶－80.96和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——多聚核苷聚合酶-80.96，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

本发明公开了一种新的多肽——多聚核苷聚合酶-80.96，编码此多肽的多核苷酸和经DNA重组技术产生这种多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于诊治多种疾病的方法，如糖尿病、甲亢、心律失常、肿瘤、各种感染等。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其诊治作用。本发明还公开了编码这种新的多聚核苷聚合酶-80.96的多核苷酸的用途。

RNA聚合酶是复杂的转录机构的核心部分，与RNA基因的转录和复制有密切关系。原核生物中各类RNA都是由一种RNA聚合酶催化合成的，真核生物则不同，他们的转录性能已经变得更加专门化了。真核生物的多聚核苷聚合酶是一种不依赖于DNA的RNA聚合酶，负责合成RNA的聚腺苷酸的尾部。。

在转录过程中，所有真核生物的信使RNAs上会出现聚腺苷酸的尾部。多聚核苷聚合酶能催化各种多聚核糖核酸的3  末端聚合A碱基的反应，能以单链RNA作为引物。(Christofori and Keller，1988；Takakgaki et al.，1989；Gilmartin andNevins，1989).Poly(A)尾的合成由多聚核苷聚合酶以及裂解和聚腺苷酸化因子(CPF)共同作用所形成。CPF在RNA的聚腺苷酸化位点AAUAAA，此位点是位于RNA的10-30核苷酸的聚腺苷酸化位点。从小牛胸腺中提取纯化的多聚核苷聚合酶是均一性的57-60kDa的蛋白。此酶的单一行式不能识别聚腺苷酸化位点AAUAAA，实际上它和RNA底物的关系并不密切。Mg²⁺到反应中，可以非特异性提高酶对RNA引物的亲和性，有效的提高位点AAUAAA和CPF的聚腺苷酸化。(Tsiapalis et al.，1975；Christofori and Keller，1988；Takakgaki et al.，1988；Wahle，1991a)

本发明的人的该酶与多聚核苷聚合酶在蛋白水平上有的62％相同性和74％的相似性。且两者均含有多聚核苷聚合酶家族的特征性结构域。基于以上各点，故认为本发明的蛋白为多聚核苷聚合酶，命名为多聚核苷聚合酶-80.96。并以此推断其与多聚核苷聚合酶相似，同为多聚核苷聚合酶家族的成员，并具有相似的生物学功能。该蛋白的在细胞内通过与特异的转录起始因子结合，以调控相应的RNA基因的转录与表达。该蛋白的突变或表达异常，将导致细胞内相关RNA基因的转录异常，进而引发各种相关的疾病。

由于如上所述多聚核苷聚合酶-80.96蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的多聚核苷聚合酶-80.96蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新多聚核苷聚合酶-80.96蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——多聚核苷聚合酶-80.96以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码多聚核苷聚合酶-80.96的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码多聚核苷聚合酶-80.96的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产多聚核苷聚合酶-80.96的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——多聚核苷聚合酶-80.96的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——多聚核苷聚合酶-80.96的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与多聚核苷聚合酶-80.96异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少75％相同性的多核苷酸。