[发明专利]一种新的多肽——磷酸酶2A催化亚基alpha14.63和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--磷酸酶2A催化亚基alpha14.63，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

蛋白磷酸酶在许多过程中起着必要的调节作用，这些过程包括新陈代谢、细胞周期事件等。蛋白磷酸酶1和2A能够被冈田酸抑制，显示了它们在肿瘤遏制中起着较为重要的作用(Bialojan & Takai，1988；Haystead et al.，1989)。然而，对于许多细胞事件中蛋白磷酸酶活性的活化-非活化机制还了解得不是很完整。

目前已经从许多组织中纯化得到了三种全酶形式的蛋白磷酸酶2A，都包含一个36Kda的催化亚基，结合一个或者多个调节亚基(55、65和72Kda)(Crouch &Safer，1980；Pato & Adelstein，1983；Tung et al.，1985)。磷酸酶2A催化亚基已经从不同物种中克隆得到，至少存在两种异构形式，分别为催化亚基alpha和催化亚基beta(Green et al.，1987；Stone et al.，1987，1988)。催化亚基alpha和beta的氨基酸序列具有97％的相同性，这说明在进化过程中它们起源于同一个基因，并且在开始的30个N末端残基中仅有7-8个氨基酸是不同的。

编码两种催化亚基异构形式的mRNA能够在目前研究所涉及的所有哺乳动物种类中找到，表明这两种异构形式具有各自独立的功能，并且能够与不同的调节亚基相互作用。虽然两种催化亚基mRNA的非编码区域没有序列上的同源性，但是在哺乳动物中每种异构形式的3’非编码区域都是高度保守的。催化亚基alpha的3’非翻译区域还含有3个多聚腺嘌呤信号，在催化亚基beta中仅存在1个多聚腺嘌呤信号。催化亚基5’侧序列缺的转录起始位点缺少TATA盒和CCAAT盒，5’非翻译区域和促进子都富含G+C，CpG和GpC序列以很高的频率出现，这与一些在所有组织中都有表达的管家基因非常相似。

将猪、鼠、牛和兔的各种组织进行Northern分析显示，催化亚基alpha的mRNA能够以相对高的水平表达，这种差异在脑中尤为明显(Khew-Goodall & Hemmings，1988；Kitagawa et al.，1988a)，其中催化亚基beta的表达水平比alpha低了8-12倍。3’非编码区域的不同序列和在不同动物中的高度保守说明它们能够自动调节稳定状态下的mRNA水平。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与磷酸酶2A催化亚基alpha的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为磷酸酶2A催化亚基alpha14.63。

由于如上所述磷酸酶2A催化亚基alpha14.63蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的磷酸酶2A催化亚基alpha14.63蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新磷酸酶2A催化亚基alpha14.63蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--磷酸酶2A催化亚基alpha14.63以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码磷酸酶2A催化亚基alpha14.63的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码磷酸酶2A催化亚基alpha14.63的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产磷酸酶2A催化亚基alpha14.63的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--磷酸酶2A催化亚基alpha14.63的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--磷酸酶2A催化亚基alpha14.63的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与磷酸酶2A催化亚基alpha14.63异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。