[发明专利]色谱定量测定装置及其制备方法

说明书

技术区域

本发明涉及利用抗原抗体反应定量测定被测物质的色谱定量测定装置及其制备方法，特别是具有不透液性片材的色谱定量测定装置及其制备方法。

背景技术

以前，作为实施水质检查、尿检查等液体试样的化学试验或临床试验的方法，广泛采用利用抗原抗体反应的免疫色谱法进行测定。一般，色谱法是指将混合物根据其构成成分进行分离的方法，由包括添加液体试样的部分、保持有随液体试样浸透可以移动的标记试剂的部分、具有与流动的分析对象物特异性结合的物质与标记试剂发生结合反应的部分、吸收流动试样的部分的试件构成。该色谱测定装置的测定方法可以将液体试样添加在试件上放置，经过一定时间后发生显色反应引起显色或变色，通过目视检测方式进行判断。

免疫色谱测定原理是利用抗原抗体反应的特异性，鉴定抗原或抗体的测定方法。其操作是将液体试样添加到免疫色谱试件上，由液体试样溶解的标记试剂向浸透方向展开，与液体试样中的分析对象物能够特异性结合的物质被固定，在测定区域发生显色。另外，免疫色谱的分析结果是通过显色反应进行判断，因此是通过目视检测方式进行记录。也就是说，由于检测结果的判断非常容易，具有用途范围广的特色。

这种采用免疫色谱法的测定可以用于各种分析对象物的检查。但是，对于分析对象物不仅需要定性检测，而且需要定量解答时，有时虽然也可以采用这种测定方法，但只能得出半定量的结果。因此，期望提供一种能得到定量分析结果的手段。

为了改善这一问题，在特开平8-240591号报告中公开了免疫色谱试件。该免疫色谱试件的测定方法是添加试样进行反应后，用检测仪器测定显色部分的吸收或反射等信号，确定试件上检测出的显色程度。此外，特开平8-334511号公报公开的免疫色谱试件的测定方法是使用图象传感器给显色的免疫色谱试件摄像，对图象转换出的色调图象进行解析处理，求出显色程度进行定量测定。

但是，使用免疫色谱试件进行定量测定时，如特开平8-240591号或特开平8-334511号列举的实施例那样，由于其显色反应伴有的显色程度的强弱或浓淡，采用分别相应的检测仪器进行定量测定。以前，一般的免疫色谱试件由于没有机械控制，且不能人为控制，液体试样的浸透速度会左右试件的浸透性。例如，由于液体试样从试件的侧面蒸发，测定区域流出的分析对象物的量不均一。另外，每次测定使用的各个免疫色谱试件有时添加的液体试样量和标记试剂量并不是恒定的。因此，存在这些原因会导致一定时间后的定量测定值差异大的问题。

而且，免疫色谱试件是添加液体试样后，经过一定时间后进行测定的，这种情况下有时浸透的标记试剂一起溶出，作为背景残留在反应层上。如果该背景的值加在显色程度上，则检测仪器的测定包含了这种误差。因此，免疫色谱试件难以在短时间内进行定量测定，另外流到反应层上的标记试剂残留量并不是恒定的，每次测定或者每个使用的试件不同，导致这时显色程度的读数误差较大。

由于以上问题，采用免疫色谱法定量测定的性能根据试件的规格和添加的液体试样量的差异，或背景带来的误差，只不过是半定量。因此，为了更准确地进行测定，强烈希望提高试件的性能。

另外，使用以前的免疫色谱试件，测定全血或细菌溶液等含有细胞成分的液体试样时，液体试样的粘性、细胞成分的存在会使反应层载体出现堵塞。结果导致测定时间长，其间出现液体试样的干燥等，造成反应的精度或定量性能差。因此，强烈需要即使在全血或细菌溶液等的测定中，也能简便而容易地测定的免疫色谱定量测定装置。

本发明的目的在于解决上述问题，提供一种色谱定量测定装置及其制备方法，测定精度不受添加的液体试样的性质影响，能够准确读取作为分析对象物的液体试样与标记试剂反应结果的显色程度，而且不受背景带来的标记试剂残留量的影响。

发明公开

本发明(权利要求1)涉及的色谱定量测定装置具有不能润湿的反应层载体支持体、该支持体上部形成的1至任意数量的部件构成的可以润湿的层，该可以润湿的层由添加液体试样的部分、保持有可以移动的标记试剂的部分、能够与具有与液体试样中的分析对象物特异性结合的物质的标记试剂进行结合反应的部分以及吸收液体试样的部分构成，其特征在于在该色谱定量测定装置中，在除添加液体试样的部分之外的表面和侧面上以密合状态设置不透液性片材。

这种结构的色谱定量测定装置可以防止水分的蒸发，使液体试样的浸透方向和浸透状况均一，另外一定时间内流过的液体试样与标记试剂以均一的浓度流出。