[发明专利]一种新的多肽——人神经传递素协同转运蛋白10.01和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人神经传递素协同转运蛋白10.01，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

细胞的功能远远不是简单的吸收营养和排泄废物，更为重要的是体内各种各样细胞之间协调和信息传递，以保证个体作为整体能够行使有效的功能。细胞与其环境和为这些信患传递类型所必须的其它细胞之间的相互作用，一定涉及到细胞膜的作用过程。在很多情况下，跨膜转运不可缺少地参与细胞与其环境之间的信息传递过程。细胞与细胞之间有许多化学信使，共同协调各组织的代谢活性，使有机体适应环境的变化，并使之做好新陈代谢的准备。

神经细胞膜上一般有钠离子通道和钾离子通道，在各种动物细胞膜中含量各不相同，以钠离子通道为研究对象，我们发现其中包含了许多种类的蛋白，神经传递素协同转运蛋白是其中较为重要的蛋白。在被突触释放后，许多神经传递素通过这种特殊的转运蛋白以及钠的协同作用，能以高的亲和力被再吸收进入突触前端，这些蛋白是安非它明和可卡因等神经运动刺激物的靶蛋白，所有的这类蛋白属于一个家族，即钠—神经传递素协同转运蛋白家族(SNF)。这个家族据现在所知已包括许多成员，大多数的靶组织为一种类型以上的神经纤维所支配，它们各用其不同的神经递质，就决定了这类蛋白的多样性。去甲肾上腺素就是这样一种神经递质，它是由支配内脏器官(如心脏、脾脏和肠道)的平滑肌细胞的交感神经纤维在交感神经末端释放的，能扩散到临近细胞并激发出特定反应，它和有关的胺类物质在大脑的很多神经通路中作为神经递质。另外，较为典型的还比如甜菜碱、肌氨酸、gamma氨基丁酸等等。

神经传递素协同转运蛋白家族属于糖蛋白，约含有600-700个氨基酸残基，数量最少的是两种细菌蛋白，只有457-508个氨基酸残基，这些蛋白多肽链一般包含12个跨膜区域，其中C-末端和N-末端都位于细胞质中，中间区段形成一个个环状结构。这个家族的蛋白中有两个较为保守的区域，第一个位于第一跨膜区的C-末端位置，从一个短的胞外环直到第二跨膜区的N-端位置；另外一个位于第三跨膜区和第四跨膜区之间的最大的跨膜环上，这个区域包含了两个保守的Cys残基，可相结合形成二硫键结构，对于构象的形成及变化起着决定作用。

神经传递素协同转运蛋白家族的特征性序列是形成其生物活性所必需。

由于如上所述人神经传递素协同转运蛋白10.01蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人神经传递素协同转运蛋白10.01蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人神经传递素协同转运蛋白10.01蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人神经传递素协同转运蛋白10.01以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人神经传递素协同转运蛋白10.01的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人神经传递素协同转运蛋白10.01的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人神经传递素协同转运蛋白10.01的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人神经传递素协同转运蛋白10.01的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人神经传递素协同转运蛋白10.01的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人神经传递素协同转运蛋白10.01异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中124-399位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1683位的序列。