[发明专利]一种新的多肽——人小压力蛋白协同蛋白53.68和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人小压力蛋白协同蛋白53.68，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

哺乳动物小压力蛋白hsp27与压力的耐受力的增加有关，其可能的机制为，它对谷胱甘肽的分子伴随和修复地位，和/或，对微丝的结构和功能的调节。我们推测，hsp27的功能依赖于与其它蛋白的特殊联合。

为了发现与hsp27联合的蛋白，我们建立了一个鼠足细胞cDNA表达库，并用酵母双杂交系统对起进行荧光检测。从中，我们获得了一个cDNA，它编码一个含有428个氨基酸的新蛋白，命名为小压力蛋白协同蛋白PASS1(proteinassociated with small stress proteins 1)。BLAST检索显示PASS1与所有已知蛋白都未显示出相似性，而cDNA顺序与一些鼠的EST克隆相似，并与Caenorhabditis elegans基因组结构具有34％的同源性。

在体外，细菌的谷胱甘肽S-转移酶-PASS1融合蛋白可与hsp27结合，hsp27与一些细胞株中过度表达的c-Myc-tagged PASS1发生共同免疫沉淀反应。PASS1与hsp27存在协同作用，PASS1在108-108氨基酸区域存在一个hsp27结合位点。Northerh杂交和Western blot分析显示，PASS1在一些组织中表达，其中表达水平最高的为睾丸，其次为足细胞。PASS1的mRNA在肾脏中的剪切方式与其它器官中不同，它在肾脏中为1.4Kb，而在其它组织中为1.8Kb。PASS1在两种细胞株中的异常表达抑制了hsp27对细胞进行抗热保护的能力，这显示出PASS1确实与hsp27在活细胞中相互作用。(Chenghua Liu，et.al，JBC，275，25，18724-18731，2000)

本发明的人的基因与小压力蛋白协同蛋白PASS1基因在蛋白水平上有82％的同一性和89％的相似性。且两者均含有小压力蛋白协同蛋白家族的特征性结构域hsp27结合位点。基于以上各点，故认为本发明的新基因为小压力蛋白协同蛋白基因，命名为{人小压力蛋白协同蛋白53.68}。并以此推断其与小压力蛋白协同蛋白PASS1相似，同为小压力蛋白协同蛋白家族的成员，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述人小压力蛋白协同蛋白53.68蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人小压力蛋白协同蛋白53.68蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人小压力蛋白协同蛋白53.68蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人小压力蛋白协同蛋白53.68以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人小压力蛋白协同蛋白53.68的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人小压力蛋白协同蛋白53.68的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人小压力蛋白协同蛋白53.68的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人小压力蛋白协同蛋白53.68的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人小压力蛋白协同蛋白53.68的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人小压力蛋白协同蛋白53.68异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少83％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中196-1662位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2039位的序列。