[发明专利]一种新的多肽——人真核生物起始因子－2相关蛋白8.8和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人真核生物起始因子-2相关蛋白8.8，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

真核生物起始因子-2(eIF-2)由三个亚基组成：alpha，beta以及gamma。EIF-2alpha的磷酸化激活eIF-2活性并抑制蛋白合成。这种调控机制被广泛运用于处于被剥夺养分，热激以及病毒感染状态下的动物细胞中。近来分离得到一种eIF-2相关蛋白：p⁶⁷。这种蛋白可以在活性的eIF-2alpha存在时，通过保护eIF-2alpha不被eIF-2激酶催化磷酸化来促进蛋白合成[Gupta，N.K.，Datta，B.，Ray，M.K.，and Roy，A.L.(1993)in Translational Regulation of Gene Expression2(Ilan，J.，Ed.)，pp.405-431，Plenum Press，New York]。

人真核生物起始因子-2(eIF-2)-相关蛋白p⁶⁷通过防止起始因子-2 alpha亚基的磷酸化，在转录调控中起重要作用，此外它还可作为一种甲硫氨酸氨肽酶(MetAP)起作用。人p⁶⁷区域的N-端域中含有两个碱性的聚赖氨酸块，以及一个天冬氨酸块。这些聚赖氨酸块参与蛋白与蛋白或蛋白与核苷酸间的反应。人p⁶⁷中还有五个极为保守的残基参与金属结合，该蛋白与其他MetAP具有相似的底物特异性，就象其他MetAP一样也是一种金属酶，它们的活性可被Co²⁺刺激并被金属螯合试剂抑制，因而这是一种钴依赖的金属酶。去除起始甲硫氨酸对于许多蛋白的正常功能是十分重要的。此类例子包括血红蛋白以及一些参与信号转导的蛋白，蛋白运输，癌细胞生长以及病毒感染，而人p⁶⁷具有双重功能，即既有一种在蛋白合成中的类p⁶⁷功能又有一种在胺基端蛋白作用中的类MetAP功能[XuanLi and Yie-Hwa Chang.Biochemical and Biophysical ResearchCommunications，1996，227：152-159]，因而它若发生突变或缺失将导致与信号转导，蛋白运输，癌细胞生长以及病毒感染等相关的疾病。

通过基因芯片的分析发现，在胎脑、原液培养的L02细胞株、0.5％FBS培养液37.C饥饿的L02细胞株、胎肾、直肠癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睾丸、胎胃、成人胃中，本发明的多肽的表达谱与人真核生物起始因子-2相关蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人真核生物起始因子-2相关蛋白8.8。

由于如上所述人真核生物起始因子-2相关蛋白8.8蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人真核生物起始因子-2相关蛋白8.8蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人真核生物起始因子-2相关蛋白8.8蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人真核生物起始因子-2相关蛋白8.8以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人真核生物起始因子-2相关蛋白8.8的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人真核生物起始因子-2相关蛋白8.8的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人真核生物起始因子-2相关蛋白8.8的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人真核生物起始因子-2相关蛋白8.8的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人真核生物起始因子-2相关蛋白8.8的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人真核生物起始因子-2相关蛋白8.8异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。