[发明专利]一种新的多肽——法呢基焦磷酸酯合成酶14.3和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——法呢基焦磷酸酯合成酶14.3，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

用佛波醇酯治疗人单细胞白血病细胞株THP-1会导致三种胆固醇合成酶mRNA2-7-折叠增加：法呢基焦磷酸酯合成酶，3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶和HMG-CoA合成酶。放射标记细胞免疫试验显示，这三种蛋白的合成率相应增加。环己酰亚胺也能导致三种蛋白增加。佛波醇酯TPA对这三种酶的诱导作用可在许多细胞类型中观察到，包括鼠肾上腺细胞株PC2，鼠肝细胞瘤细胞株H4和人肝细胞瘤细胞株HepG2等。TPA对这三种酶的诱导作用并不局限于特定的细胞类型或局限于正在分化的细胞。

法呢基焦磷酸酯(FPP)合成酶是聚异戊烯转移酶，它在胆固醇生物合成过程中催化异戊烯焦磷酸酯到二甲丙烯基焦磷酸酯、香叶基焦磷酸酯的依次浓缩。FPP合成酶的编码基因部分片段CR-39是一个胆固醇可抑制性鼠肝脏cDNA。FPP合成酶在HepG2和鼠肝脏中与HMG-CoA还原酶和HMG-CoA合成酶共同被调节，它们会影响细胞内胆固醇水平。FPP合成酶可能与细胞的分化和生长有关，它可在由单核细胞分化成巨噬细胞过程中，与HMG-CoA还原酶、HMG-CoA合成酶和LDL受体一起，为新膜合成提供所需的胆固醇。(Douglas J.Wilkin，et.al，The Journalof Biological Chemistry，233，4607-4614)

本发明的人的基因与鼠法呢基焦磷酸酯(FPP)合成酶基因部分片段CR-39在蛋白水平上有79％的同一性和82％的相似性。基于以上各点，故认为本发明的新基因为法呢基焦磷酸酯(FPP)合成酶基因，命名为{法呢基焦磷酸酯合成酶14.3}。并以此推断其与鼠CR-39编码法呢基焦磷酸酯(FPP)合成酶相似，同为法呢基焦磷酸酯(FPP)合成酶，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述法呢基焦磷酸酯合成酶14.3蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的法呢基焦磷酸酯合成酶14.3蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新法呢基焦磷酸酯合成酶14.3蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——法呢基焦磷酸酯合成酶14.3以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码法呢基焦磷酸酯合成酶14.3的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码法呢基焦磷酸酯合成酶14.3的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产法呢基焦磷酸酯合成酶14.3的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——法呢基焦磷酸酯合成酶14.3的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——法呢基焦磷酸酯合成酶14.3的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与法呢基焦磷酸酯合成酶14.3异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少80％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中1586-1978位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2646位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。