[发明专利]一种新的多肽——溴基结构域12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——溴基结构域12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

溴基结构域是一由约70个氨基酸组成的保守区域。有些蛋白含有单一的溴基结构域，而有些蛋白含有多个溴基结构域。BRM基因是果蝇中得到的一种基因，与SNF2/SW12较相似，这些蛋白均在同源异型蛋白的转录活性中起重要作用。

以上三种蛋白均含有由77个氨基酸残基组成的结构基序，这一结构基序在酵母及人的各种调控蛋白中也有存在，其组成了一新的调控蛋白家族[Tamkun J.W.，Deuring R.Et al.，Cell，1992，68：330-572]。该结构基序在生物体内参与蛋白与蛋白的相互作用，其可能对参与转录活性的多成分复合物的活性及聚集起重要的调节作用。若该结构域或含有该结构域的蛋白表达异常将导致一些DNA转录活性调控蛋白的功能异常，从而从转录水平影响各种蛋白的表达，如无法正常而正确地形成各种同源异构蛋白，从而引发各组织及器官与蛋白表达异常相关的疾病。

溴基结构域由以下保守的序列组成：[STANVF]-X(2)-F-X(4)-[DNS]-X(5，7)-[DENQTF]-Y-[HFY]-X(2)-[LIVMFY]-X(3)-[LIVM]-X(4)-[LIVM]-X(6，8)-Y-X(12，13)-[LIVM]-X(2)-N-[SACF]-X(2)-[FY]。该结构域在生物体内与DNA的正确结合及转录调节相关。该家族的成员在生物体内，尤其在生物体生长发育过程中调节蛋白与蛋白间的相互作用。它们通常通过对下游调节基因的转录调节来调节各种蛋白的转录表达。其表达异常可能会导致蛋白功能异常，从而导致全身各部分的发育异常，引发各种相关的发育紊乱性疾病、免疫紊乱性疾病甚至各种肿瘤及癌症等。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与溴基结构域的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为溴基结构域12。

由于如上所述溴基结构域12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的溴基结构域12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新溴基结构域12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——溴基结构域12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码溴基结构域12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码溴基结构域12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产溴基结构域12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——溴基结构域12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——溴基结构域12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与溴基结构域12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中262-591位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-867位的序列。