[发明专利]一种食、药用外生菌根菌制种和人工栽培方法

说明书

本发明属于食药用菌制种及人工栽培技术领域，尤其涉及食药用外生菌根菌制种及人工栽培方法。

目前没有成功的人工栽培美味牛肝菌(Boletus edulis)、松乳菇(Lactrius deliciosus)、多汁乳菇(Lactarius volemus)、鸡油菌(Cantharellus vibarius)、绿菇(Russula virescens)等食药用外生菌根菌的方法。所见报道有：1、方平夷的《对松乳菇人工栽培的尝试》(《食用菌》1994年第3期)。其采用的方法是：(1)采用MS基本培养基，除去植物生长素和细胞分裂素，补充3克蛋白胨、2克酵母浸膏、20克琼脂作为分离菌种、母种培养和保存培养基；(2)原种培养基采用小麦或牛粪粉与大米的混合物；(3)子实体形成培养基为棉子壳腐烂茅草和蔗糖；(4)分离培养母种方法是选取菌柄或菌柄着生处的部分菌盖，于斜面培养基上培养，挑选菌丝转接培养成母种，再扩原种，最后进行子实体培养。其实验结果是人工栽培条件下可以形成子实体，但不易形成，就是形成也不易长大。2、发明《松乳菇母种培养基及松乳菇人工栽培方法》(C1240572A)所提供的是半人工栽培方法，所用培养基菌丝生长缓慢，生长周期长，从制种到出菇需4-5年，同时需栽种马尾松。

本发明的目的是提供一种开发新菌株特别是食、药用外生菌根菌的制种和高产稳产人工栽培方法，拓宽食药用菌人工栽培领域，实现美味牛肝菌、松乳菇、多汁乳菇等食药用外生菌根菌当年栽培当年可产多批菇、一年栽培多年出菇。

本发明的目的是采用以下技术方案实现的：栽培工序包括取种-制母种-制原种-制栽培种-制栽培袋-出菇管理。本发明的主要特点是：

(1.1)采种时用无菌保鲜液在采集地就地处理子实体，组织分离在无菌无毒环境中取靠近菌索的菌柄基部黄豆大组织块，转入母种培养基上，于22-32℃中培养，待组织块萌发菌丝后提纯转管；

(1.1.1)无菌保鲜液配制方法，配方为食用明矾10克、加碘食盐20克、3％呋喃丹30克、水1000毫升，配制方法为：将明矾和呋喃丹分别加水加热溶解后，过滤，取滤液混合，加食盐熔解后装瓶灭菌，用时摇匀；

(1.1.2)食、药用外生菌根菌母种培养基配制方法：

A.制松树汁：取鲜马尾松无节木质部为原料剁或粉碎成颗粒，

  加水煮沸后改文火熬制2小时，1千克木料加水1升熬至0.5

  升用纱布过滤备用；

B.制马铃薯汁：将0.25千克去皮马铃薯加水0.7升，用文火熬

  至0.5升过滤，备用；

C.磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁1克，用少量热水溶解；

D.将上述三种溶液混合，加琼脂20克、蔗糖20克，煮沸溶解

  后文火煮干至1000毫升，分装试管，每管10毫升。试管棉

  塞内端包微孔防潮膜，然后7支1捆，捆紧后包牛皮纸；

E.灭菌时必须先将高压锅内冷空气排出，灭菌压力为1.2-1.5

  千克/平方厘米，灭菌45分钟，压力回0后开锅，让余热烘

  干棉塞，于50℃温度左右摆斜面。摆斜面时试管上下需盖保

  温材料，待斜面凝固后立即将试管竖直让冷凝水重新回到斜

  面内；

(1.2)原种、栽培种使用稻谷颗粒种，其制备方法是：将发芽破胸的稻谷用马铃薯20％、白糖2％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸镁0.05％混液煮沸杀青，拌入3％石膏粉，用盐水瓶分装灭菌；冷却后接种，置22-32℃温度下培养，三天后进行第一次摇瓶，以后每天摇一次瓶并检查纯度，直至菌丝充满谷粒，栽培种用同样的方法扩大培养1次；

(1.3)栽培袋的制作方法是：

(1.3.1)栽培料配方是：马尾松新鲜木屑400千克、棉壳100千克、麦麸100千克、白糖10千克、磷酸二氢钾0.75千克、硫酸镁0.5千克、马尾松林地腐殖质土100千克、明矾5千克，含水量60％，PH自然；

(1.3.2)培养料采用两次灭菌方法：培养料混合拌匀调湿后，迅速装入75cm*45cm纤维袋中，离地建堆，堆四周用塑料膜密封，设保温层，保温层外加通过地脚螺栓固定的双层密网，利用风机加压使高压蒸汽在蒸汽发生器和培养料中快速循环加热，培养料在1个小时达到55℃，2小时达到70℃，3小时达到85℃，并保持4小时，经这样预蒸，干湿均匀的培养料翻凉后，分装塑料袋，十袋装入一纤维袋；再进行第二次蒸汽消毒，保持温度100℃10小时；