[发明专利]一种新的多肽——人sec5蛋白37和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人sec5蛋白37，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

胞内小泡运输途径可构成膜区室并分泌胞外信使。由一系列小泡及定向膜蛋白确保膜融合的忠实性，这些蛋白形成一些特异的复合物以确保正确的膜融合。那些基本的膜识别及融合机制的调控是为了符合不同的运输步骤，特异性分化细胞以及特定生理状态的需要。例如，神经末端的胞吐与钙浓缩紧密相关。此外，类似神经元及上皮细胞等极性细胞必须严格控制小泡与定向膜亚区的融合位点。其中有一套蛋白对于该过程极为重要，它们是外胞囊复合物的组分，其基因分别为：sec3,-5,-6,-8,-10,-15，及exo70。

该复合物中的sec5蛋白由924个氨基酸长度的ORF(开放阅读框)编码，分子量约为一百多个kDa，等电点约为7.0左右。在其氨基端处含有一21个氨基酸区域，形成一个卷曲螺旋域，sec6,sec8，及sec10蛋白也含有类似的卷曲螺旋域，该复合物中的许多亚基就是通过这些卷曲螺旋域互相作用。其他的膜运输蛋白复合物中也含有卷曲螺旋域，膜运输蛋白复合物间也是通过这些区域相互作用。Sec5蛋白存在于哺乳动物的各种组织，例如脑，肺，及肾中，在睾丸中尤其富含sec5蛋白。

本发明的多肽与鼠sec5(rsec5)蛋白在蛋白水平上具有94％的同一性及97％的相似性，且具有氨基端的卷曲螺旋域，结构与rsec5相似，故被认为属于sec5蛋白，命名为人sec5蛋白37。该多肽及其激动剂，抑制剂，拮抗剂可用于诊断，防治与脑，肺，肾尤其是睾丸的神经或分化细胞紊乱有关的疾病。

由于如上所述人sec5蛋白37蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人sec5蛋白37蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人sec5蛋白37蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人sec5蛋白37以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人sec5蛋白37的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人sec5蛋白37的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人sec5蛋白37的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人sec5蛋白37的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人sec5蛋白37的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人sec5蛋白37异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少95％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中29-1042位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1607位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人sec5蛋白37蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与人sec5蛋白37蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。